PCR - MOLEKULÄR BIOLOGI
Du önskar:
- bestämma en sekvens för att identifiera mutationer (punktmutationer (SNP), insättningar, deletioner)
- utvärdera släktskap mellan individer eller populationer
- påvisa närvaron av en viss organism i ett biologiskt prov
- genomföra kloning i en expressionsvektor för syntes av ett rekombinant protein...
Dessa analyser kräver vanligtvis en amplifikation av genetiskt material genom en enzymatisk reaktion som kallas PCR (Polymerase Chain Reaction). Denna reaktion utförs vanligtvis utifrån DNA. För vissa specifika tillämpningar används cDNA som erhållits genom omvänd transkription av RNA.
Metodens princip
DNA-molekyler, i sitt naturliga tillstånd, består av två komplementära strängar. Övergången till en temperatur över 94 °C leder till separation av de två DNA-strängarna och destruktion av sekundära strukturer (denatureringssteget).
Molekyler...